MEIO MEM (EARLE)

                      

DEFINIÇÃO: É uma mistura de sais enriquecida com aminoácidos, vitaminas e outros componentes essenciais para o crescimento celular.

AÇÃO: Age como ma solução nutritiva em cultivo celular.

INDICAÇÃO: Destina-se a cultura de células humanas e de outros animais. Este meio é fornecido na forma em pó e líquida. Na forma em pó ele tem a vantagem de se manter estável por mais de 24 meses, se conservado bem fechado, em geladeira. Outra grande vantagem do meio em pó é a constância de resultados quando se programam culturas celulares a longo prazo, utilizando nesse caso um mesmo lote. O MEIO MEM é considerado uma solução nutritiva padrão em cultura de células por possuir os nutrientes básicos para a manutenção celular. Este meio pode ser fornecido com aminoácidos essenciais, não essenciais ou ainda variando qualquer outro componente.

VANTAGENS: Testado em pelo menos três linhagens celulares, sendo sempre determinado o seu pH e osmolaridade, cada lote só é liberado se estiver dentro dos limites adequados, além de promover um ótimo crescimento celular.

CARACTERÍSTICAS FÍSICO QUÍMICAS:

-Aspecto: pó róseo e homogêneo
-Tamanho das Particulas: aproximadamente 20 microns
-Solubilidade : solução límpida na concentração de uso (1x)
-pH à 25oC (sem NaHCO3): 5,9 + 0,5
-pH à 25oC (com NaHCO3): 7,60 + 0,5 
-Osmolaridade (sem NaHCO3): 250 + 5%
-Osmolaridade (com NaHCO3): 295 + 5%

CONSERVAÇÃO: Estocar o meio em pó ou preparo líquido entre 2 à 6oC. Se essas condições não forem mantidas, poderão ser observados alterações do tipo:

1. Mudança de cor
2. Granulações
3. Insolubilidade
4. Alteração de pH
5. Incapacidade de manter a integridade celular sob condições normais.

PREPARAÇÃO: O MEIO MEM em pó é extremamente higroscópico devendo ser protegido do meio ambiente. Não são recomendadas preparações de concentrações maiores que as especificadas, devido a grande possibilidade de formação de precipitados.

1. Medir aproximadamente 90% do vlume a ser preparado de água tridestilada (15-20oC).
2. Adicionar lentamente o pó sob agitação constante. NÃO AQUEÇA A ÁGUA.
3. Depois que o pó estiver totalmente dissolvido, acrescentar por litro 2,2g de bicarbonato de sódio 5,6%.
4. Acrescentar antibióticos ou outras substâncias que julgar necessário.
5. Poder-se-á acertar o pH conforme o desejado, utilizando-se HCl 1N ou NaOH 0,1N, ou ainda gaseificando-se com CO2.
6. Completar o volume cm água tridestilada e esterilizar por filtração em membranas de 0,22m, utilizando pressão positiva.

APRESENTAÇÃO : PÓ - Frascos com pó para preparo de 1, 10 e 50 litros.
LÍQUIDO - Frasco com 100 ou 500 ml.
CONSERVAÇÃO : 2 à 6oC
VALIDADE : 12 meses

COMPOSIÇÃO MEIO MEM

SAIS ORGÂNICOS mg/L L-metionina 15,00
CaCl2.H2O 264,87 L-fenilalanina 32,00
KCl 400,00 L-prolina 11,50
MgSO4.7H2O 200,00 L-serina 10,50
NaCL 6.800,00 L-treonina 48,00
NaHCO3 2.200,00 L-triptofano 10,00
NaH2PO4.H2O 140,00 L-tirosina 52,10
    L-valina 46,00
AMINOÁCIDOS mg/L    
L-alanina 8,90 VITAMINAS mg/L
L-arginina.HCL 126,00 pantotenato de cálcio 1,00
L-asparigina 15,00 cloreto de colina 1,00
L-ácido aspártico 13,30 ácido fólico 1,00
L-cistina 31,29 inositol 2,00
L-ácido glutâmico 14,70 nicotinamida 1,00
L-glutamina 292,00 piridoxal.HCL 1,00
glicina 7,50 riboflavina 0,10
L-histidina.HCl.H2O 42,00 tiamina.HCL 1,00
L-isoleucina 52,00    
L-leucina 52,00 OUTROS COMPONENTES mg/L
L-lisina.HCl 72,00   glicose 1.000,00
      vermelho de fenol 10,00